生物技术克隆动值物观后感选录(4)

根据人的cDNA序列和人的基因组序列比对结果，预测的猪USF1基因内含子，参照分离得到的基因序列，设计U4F/U4R，U5F/U5R，U6F/U6R，U7F/U7R，U8F/U8R和U9F/U9R等6对引物，以大白猪基因组DNA为模板，PCR扩增猪USF1基因的10个内含子序列，扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳，检测结果如图3。
引物U4F/U4R在猪基因组中的扩增片段长度是2 094 bp，其中第1内含子的长度为2 007 bp;引物U5F/U5R在猪基因组中的扩增片段长度740 bp，其中第2，3内含子的长度分别为363 bp和157 bp;引物U6F/U6R在猪基因组中的.扩增片段长度783 bp，其中第4，5内含子的长度分别为301 bp和241 bp;引物U7F/U7R在猪基因组中的扩增片段长度600 bp，其中第6，7内含子的长度分别为249 bp和135 bp;引物U8F/U8R在猪基因组中的扩增片段长度656 bp，其中第8，9内含子的长度分别为153 bp和249 bp;引物U9F/U9R在猪基因组中的扩增片段长度690 bp，其中第10内含子的长度为192 bp。利用DNAStar软件的SeqMan程序将扩增得到的片段进行拼接，得到一条5 516 bp的DNA序列，将序列拼接提交到GenBank收录号为EF 625885。

基因组序列分析发现猪USF1基因包含11个外显子和10个内含子，内含子的剪接方式都符合“GT-AG”法则。 3 小结与讨论
本研究中猪USF1基因的cDNA序列与人和小鼠的同源性分别为99%和98%;编码区的高度保守性证实了所分离基因的正确性，同时也为利用小鼠等模式动物的基因信息来进行畜禽基因组学的研究提供依据。