不会做基因敲除细胞株？轻松5步构建流程(3)

五．诱导系统：
外源蛋白的诱导表达/沉默能很好比较本底和干预的区别，非常有力的诠释目的基因/蛋白的作用机理，特别适合研究自身具有毒性的蛋白，现已经被广泛使用。
Cas9x海星生物提供可诱导蛋白表达/基因敲除细胞株构建服务借助于真核表达载体/慢病毒系统，构建含有“开关”控制表达/沉默目的基因的质粒/病毒，通过电转/感染在各种细胞基因组上整合载体，利用抗生素筛选，得到可诱导的稳定细胞株，经过32代的稳定性QC检测，完成基因敲除细胞株的构建工作。
主要包含如下步骤:
1. 载体构建（诱导质粒载体、病毒载体）；
2. 转染；感染；电转；
3. “开关”诱导下目的蛋白初步检测；
4. 抗生素筛选；

5. “开关”目的蛋白再次检测（定性/半定量）；
6. 单克隆细胞株稳定性检测。
以上内容由海星生物（http://www.cas9x.com)提供